Université Paris Cité
Cytométrie en flux 2 Avancée : De l'analyse au tri - Sciences
Certification / expertise
5 jour(s)
2500 € HT
Université
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Objectifs
Présentation - Cytométrie en flux 2 Avancée : De l'analyse au tri - SciencesObjectifs
- Connaitre et maîtriser les techniques avancées de cytométrie en flux comme le tri cellulaire et l’analyse de billes cytométriques (cours théorique et travaux pratiques).
Compétences visées
A l'issue de la formation, l'apprenant est capable de:
- Maîtriser le tri cellulaire sur Trieur Aria III
- Réaliser et analyser une expérience à base de billes cytométriques (CBA et/ou Luminex).
- Réaliser le contrôle qualité des cytomètres BD.
- Possibilité de mettre en œuvre des techniques supplémentaires à la demande des participant.e.s
Public visé
Technicien.ne.s, ingénieur.e.s, chercheur.e.s des entreprises et des collectivités dans le domaine des sciences du vivant.Programme
Partie théorique :Les bases de la cytométrie :
- Introduction.
- Fluidique.
- Lasers et détecteurs de morphologie cellulaire.
- Fluorochromes et détecteurs de fluorescence.
- Compensations.
- Les contrôles isotypiques.
- Analyses.
- Soft.
- Contrôle qualité.
Les champs d’application de la cytométrie :
- Marquage phénotypique (surface et intracellulaire).
- Cycle cellulaire-Apoptose-Anomalies chromosomiques.
- Réactions d’oxydation-Signal calcique-Marquage d’organelles.
- Nouvelles applications : Analyse de la transduction du signal/Fluorescent Bar Coding/Mesure d’analytes solubles/Imaging des cellules en flux/Cytométrie de masse.
- Fluorescent Activated Cell Sorting.
Partie pratique :
- Des splénocytes stimulés in vitro seront mis à disposition des participants.
- Un marquage CFSE ayant été réalisé avant le début de la stimulation, il sera possible d’étudier le nombre de cycles cellulaires effectués par ces cellules en fonction de diverses conditions de culture. Les cytokines présentes dans les surnageants de ces cultures seront étudiées par CBA. Des sous-populations spléniques seront triées par cytométrie en flux.
- Marquages polychromatiques ≥ 6 couleurs sur BD LSRII avec traitement des compensations.
- Cytometric Bead Arrays et lecture sur Luminex ou FACSARRAY.
- Tri cellulaire sur trieur BD ARIA III.
- Procédures de maintenance.
- Contrôle qualité des cytomètres.
- Analyses.
- Présentations orales.
- Table ronde et debriefing.
Des modifications mineures peuvent être apportées sous la responsabilité de l’encadrement pédagogique.
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Les prochaines sessions
À Paris
De l'année 2024 à 2025
Centre
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5 Rue Thomas Mann
75205 Paris cedex 13
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En résumé
Objectif
Certification / expertise
Durée
5 jour(s)
Coût
2500 € HT
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